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非选择题-解答题 较难0.4 引用3 组卷215
消癌平是乌骨藤提取物水溶液，临床上治疗胃癌已获良好疗效。欲进一步研究其对癌症的作用效果，某研究人员进行了以下实验。
实验材料：人胃癌细胞SGC-7901细胞株，96孔板，细胞培养液，50mg/mL的消癌平、生理盐水，CO2培养箱，MTT作用液（一种检测细胞存活和生长的试剂）等
实验思路：
取对数生长的细胞，计数后配制成细胞悬液，随后加入96孔板，置于37℃CO2培养箱。将细胞悬液均分成6组，用生理盐水和药物（不同浓度的消癌平）作用7d，加MTT作用液，测OD值，计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率。抑制率=（对照组OD540-加药组OD540）/对照组OD540×100%。回答下列问题：
（1）癌细胞增殖情况的判定可通过细胞计数，常采用血细胞计数法，若本实验用的对数生长期细胞数量要达到5×106个/mL，则采用25（中）×16（小）规格，每小格高度0．10mm，面积1/100mm2的计数板，计数总数需达____________个癌细胞；此外癌细胞标志分泌物的检查，也是临床常用方法。本实验中可取经培养后的癌细胞悬液，进行___________来检测。
（2）请设计实验结果记录表___________。
（3）分析与讨论：
①用流式细胞仪检测消癌平针剂对人胃癌（SGC-7901）细胞的作用机理如下图，则抑制作用在细胞周期___________时期，关于抑制作用方式，请你提出合理的假设____________________。

②若采用体内试验的方法研究消癌平对人胃癌细胞治疗作用，在将人胃癌（SGC-7901）细胞制备成的细胞凝块接种到小鼠体内时，应对小鼠作____________处理。
③为了更全面地了解消癌平对癌细胞的治疗效果，还可以从____________方面开展研究。（请答出2点）
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知识点：细胞增殖的方式及细胞周期细胞癌变的原因及防治免疫学的应用及实例分析验证性实验与探究性实验 答案解析 【答案】很抱歉，登录后才可免费查看答案和解析！
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现代药理学研究证实，人参皂苷对癌细胞的生长有抑制作用，能诱导肿瘤细胞凋亡。某研究人员为了验证人参皂甙-Rh2（GS-Rh2）能抑制人肝癌Bel-7404细胞增殖，并诱导其凋亡，为开发出一种抗肿瘤新药提供进一步的实验依据。请根据以下所给的材料用具完善实验思路，并分析回答有关问题：
材料用具：人肝癌Bel-7404细胞株，10%小牛血清的培养液（含100IU/ml青霉素和0.1mg/ml链霉素），人参皂甙-Rh2（GS-Rh2）浓度分别为6.25、12.5、25.0、50.0、100μg/ml（生理盐水配而成），生理盐水，5%CO2恒温培养箱，细胞培养板若干，流式细胞仪（检测并计算各组的细胞凋亡率）等所需要仪器，其中检测和计算细胞凋亡率具体方法不作要求。
（1）实验思路：
①取若干个洁净并符合实验条件的细胞培养板均分为成______组，分别加入等量浓度为1×105/ml的人肝癌Bel-7404细胞悬液和____________，放在______中培养6h。
②给各组细胞培养板加入分别为____________；对照组加入______。
③各组细胞培养板置于适宜且相同条件下培养，6h、12h、24h、48h、72h分别定时检测并计算______。
（2）结论与分析：
①实验证实了GS-Rh2能诱导Bel-7404细胞凋亡，这种作用具有一定的剂量依赖性和时间依赖性。即随着GS-Rh2浓度增加和______，Bel-7404细胞的______逐渐增加。
②实验结果还表明，GS-Rh2对Bel-7404细胞生长具有抑制作用：于药处理后48h，采用MTT法（是一种检测细胞存活和生长的方法）在上述系列浓度（由低到高）GS-Rh2下测得抑制率分别为23.7%、37.3%、54.2%、79.7%和93.2%，请根据不同浓度下的抑制率绘制曲线，其中横坐标数据间距设置不作要求______。
现代药理学研究证实，人参皂苷对癌细胞的生长有抑制作用，能诱导肿瘤细胞凋亡，某研究人员为了验证人参皂甙-Rh2(GS-Rh2)能抑制人肝癌Bel-7404细胞增殖并诱导其凋亡，从而为开发出一种抗肿瘤新药提供进一步的实验依据。请根据以下所给材料及用具提出实验思路。
材料用具：
人肝癌Bel-7404细胞株，10%小牛血清的培养液（含100IU/ml青霉素和0.1mg/ml链霉素），人参皂甙-Rh2(GS-Rh2)，浓度分别为6.25、12.5、25.0、50.0、100μg/ml，5%CO2恒温培养箱，细胞培养板若干，流式细胞仪（检测并计算各组的细胞凋亡率）等其他所需要仪器等，其中检测和计算细胞凋亡率具体方法不要求。
（1）实验思路：（请补充实验过程）：
①取洁净并符合实验条件的细胞培养板______个，分别加入______浓度为1×105 /ml的人肝癌Bel-7404细胞悬液，______中培养6h。
②给各组细胞培养板加入分别为______；对照组加入______。
③各组细胞培养板在适宜且相同条件下进行培养，6h、12h、24h、48h、72h分别定时检测并计算______。
（2）结论与分析：
①实验证实了GS-Rh2能诱导Bel-7404细胞凋亡，这种作用具有一定的剂量依赖性和时间依赖性。即随着GS-Rh2浓度增加和______，Bel-7404细胞的______逐渐增加。
②实验结果还表明，GS-Rh2对Bel-7404细胞生长具有抑制作用：于药处理后48h，采用MTT法（是一种检测细胞存活和生长的方法）在上述系列浓度（由低到高）GS-Rh2下测得抑制率分别为23.7%、37.3%、54.2%、79.7%和93.2%，请根据不同浓度下的抑制率绘制量效曲线，其中横坐标数据间距设置不作要求____。
丹参酮是从中药丹参中提取的具有抗肿瘤活性的脂溶性菲醌化合物，其作用机制之一是诱导细胞凋亡。以下是相关的实验研究过程及结果：
实验材料：人肝癌细胞（HepG2），培养液，0.02%二甲亚砜溶液，用0.02%二甲亚砜溶解的0.5 ug/mL、1 ug/mL、1.5 ug/mL的丹参酮溶液，培养瓶等。
①将等量的人肝癌细胞（HepG2）悬液，分别接种于若干含有等量培养液的培养瓶中；将培养瓶放于37℃、5%CO2培养箱中培养24 h，静置、去掉上清液；
②______________，再加入等量的培养液，于37 ℃、5% CO2培养箱中继续培养；
③培养72 h，每24 h用细胞计数仪检测癌细胞数。
（1）请完善上述实验步骤中相关内容。____________________________________
（2）本实验的自变量是________________。
（3）设对照组癌细胞增殖率为100%，用下面公式计算各用药组癌细胞增殖率：增殖率（%）＝[（用药组各时段癌细胞数－用药组开始癌细胞数）/（对照组各时段癌细胞数－对照组开始癌细胞数）]×100。得到以下数据：

表1 丹参酮对HepG2细胞增殖率的影响 （%）
组别培养时间/h
244872
对照组100100100
给药组
ug/mL		0.5786248
1.0682621
1.548125

①请将表中前48 h的数据转化为相应给药组细胞增殖率随时间变化的柱形图________________。
②通过数据和柱形图分析可以得出丹参酮对HepG2细胞的作用效果的特点是：___________。
（4）将培养48 h的培养液离心，去除上清液后经过一系列的处理及分析，得到对照组和给药组48 h细胞周期变化、凋亡率及凋亡蛋白Bax和Bcl－2的表达量如表所示：表2 丹参酮对HepG2细胞周期、凋亡率及凋亡蛋白基因Bax和Bcl－2的表达的影响
组别G1SG2＋M凋亡率BaxBcl-2
对照组55%36%9%5.6%28%53%
实验组67%24%9%32.6%37%38%

据此推测，丹参酮使HepG2细胞周期阻滞于________期。丹参酮可能通过促进HepG2内________的表达来诱导细胞凋亡从而抑制肿瘤的生长。
（5）顺铂（DDP）是一种DNA损伤药物，也是目前临床上多种癌症化疗的首选药物。若要探究丹参酮联合顺铂对HepG2细胞生长的影响，应还需设置_______________________给药组才能得出结论。

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