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非选择题-解答题 较难0.4 引用2 组卷677
截止2020年5月,新冠病毒(2019-nCoV)已在全球210多个国家和地区蔓延传播,引发了全球性的“防疫大战”。在防疫战中,尽早确诊并及时隔离是防止新冠病毒过度传播的有效手段。在现有的检测新冠病毒的方法中,最常用的是“荧光PCR法”。其基本原理是:将新冠病毒RNA逆转录为DNA,通过采用多重荧光RT一PCR技术,以2019—nCOV的两个独立基因ORF1ab基因和N基因的保守区为靶位点设计特异性的引物和一定量的荧光标记的DNA探针,单管双检同时测定新型冠状病毒两个独立基因,消除由于病毒变异带来的漏检风险。
请回答下列问题:
(1)“荧光PCR法”所用的试剂盒中通常都应该含有:______________________、引物、四种脱氧核苷酸、缓冲体系。
(2)如果要成功将上述两个独立基因分别扩增出来,则在试剂盒中的引物应该有___________种,下图为“基因ORFlab”对应的cDNA片段结构示意图,则与之对应的引物结合的部位应该是图中的___________(用图中数学作答)。

(3)在检测过程中,随着PCR的进行,反应产物不断累积,“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加。可通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图(如图)。

①“平台期”出现的最可能原因是:______________________
②理论上,在检测过程中,有荧光标记的“杂交双链”出现,则说明检测结果呈___________(填“阴”或“阳”)性,但为了保证检测结果的准确性,一般会设定“双链荧光强度”的阈值(如图虚线),即达到或超过阈值时才确诊。现有甲、乙两个待检样本,在检测过程中都出现了上述形态的曲线,但甲的a点比乙的a点明显左移。请给这种结果做出科学合理的解释(试剂盒合格且正常,操作过程规范且准确):______________________
(4)某些“阴谋论者”认为新冠病毒是“生物武器”,但这显然是不攻自破的,因为任何热爱和平的国家、组织和个人都不可能去研究这类“人类公敌”。早在1998年,中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中,重申:______________________
2020·全国·模拟预测
知识点:PCR扩增的原理与过程禁止生物武器新型冠状病毒及相关 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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新冠病毒是一种单链RNA病毒,常用“荧光RT—PCR技术”进行检测,方法是取检测者的mRNA逆转录出cDNA,并大量扩增,时,用荧光标记的新冠病毒核酸探针来检测PCR产物中是否含有新冠病毒的cDNA.请回答下列问题:
(1)“荧光RT—PCR技术”所用的试剂盒中通常都应该含有:____________、荧光标记的核酸探针、引物、dNTP、缓冲体系。
(2)如果要同时扩增两种基因,则试剂盒中的引物应该有______种。下图为新冠病毒的“ORFlab基因”对应的cDNA片段结构示意图,则与之对应的引物结合的部位应该是图中的______(子链延伸方向为其自身的5′→3′,用图中数字作答)。若已知该基因的引物I,能否依据其碱基序列设计出另一种引物Ⅱ?____________,理由是______________________________

(3)在检测过程中,随着PCR的进行,反应产物不断累积,“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加。可通过荧光强度的变化监测产物量的变化从而得到一条荧光扩增曲线图(如下图)。

①“平台期”出现的最可能的原因是________________________
②理论上,在检测过程中,有荧光标记的“杂交双链”出现,则说明检测结果呈______(填“阴”或“阳”)性,但为了保证检测结果的准确性,一般要达到或超过阈值时才确诊。现有两个待检样本,检测时都出现了上述形态的曲线,但甲的a点比乙的a点明显左移。请给这种结果做出科学合理的解释(试剂盒合格且正常,操作过程规范且准确):______
新冠病毒是一种单链RNA病毒,常用“荧光RT-PCR技术”进行检测,方法是取检测者的mRNA在试剂盒中逆转录出cDNA,并大量扩增,同时利用盒中荧光标记的新冠病毒核酸探针来检测PCR产物中是否含有新冠病毒的cDNA,在检测过程中,随着PCR的进行,反应产物不断累积,“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加,可通过荧光强度的变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图(如下图)。请回答下列问题:

(1)题中“荧光RT-PCR技术”所用的试剂盒中应该含有__________;检测者mRNA、________、逆转录酶、引物,dNTP、缓冲体系。
(2)如果要同时扩增两种基因,则试剂盒中的引物应该有_____种,引物的作用是_______
(3)上图中“平台期”出现的最可能的原因是_________。理论上,在检测过程中,有荧光标记的“杂交双链”出现,则说明检测结果呈____(填“阴”或“阳”)性,但为了保证检测结果的准确性,一般要达到或超过阈值时才确诊。现有甲乙两个待检样本,检测时都出现了上述形态的曲线,但甲的a点比乙的a点明显左移,请给这种结果做出科学合理的解释(试剂盒合格且正富,操作过程规范且准确):____________________________________________________________________________________
(4)除核酸检测外,研究人员还研发了利用生产单克隆抗体的技术,生产出能与新冠病毒结合的特异性抗体。当杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养时,为防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害;应采取的措施是________________,新冠病毒的疫苗的有效成分属于抗体还是抗原?______________
新冠病毒的疫苗所含有效成分可以是经人类改造过的病毒吗?试说明理由。_____________

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