非选择题-解答题 适中0.65 引用6 组卷268
乙烯具有促进果实成熟的作用,ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术(原理如图1),可以抑制这两个基因的表达,从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点,下图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。
(1)图2中的2A11为特异性启动子,则该2A11应在番茄的___ (器官)中启动基因的转录。
(2)从番茄成熟果实中提取___ 为模板,利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因,以进行拼接构成融合基因。
(3)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点,用限制酶___ 对上述两个基因进行酶切,再串联成融合基因,相应的Ti质粒应用限制酶___ 进行切割,确保融合基因能够插入载体中。
(4)为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因___ (正向/反向)插入在启动子2A11的下游即可构成反义融合基因。将图中表达载体与农杆菌菌液混合后,接种在含有___ 的培养基中,可筛选出含有反义融合基因的农杆菌,再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。
(5)在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,___ (填能/不能)用放射性物质标记的ACC氧化(合成)酶基因片段做探针进行检测,理由是___ 。
(1)图2中的2A11为特异性启动子,则该2A11应在番茄的
(2)从番茄成熟果实中提取
(3)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位点,用限制酶
(4)为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因
(5)在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,
19-20高三上·江苏扬州·期末
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乙烯具有促进果实成熟的作用,ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄细胞合成乙烯的两个关键酶。利用反义DNA技术(原理如图1),可以抑制这两个基因的表达,从而使番茄具有耐储存、宜运输的优点,下图2为融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反义表达载体的结构示意图。
(1)图2中的2A11为特异性启动子,则该2A11应在番茄的________ (器官)中启动基因的转录。从该器官中提取________ 为模板,利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因,以进行拼接构成融合基因。
(2)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamH I和EcoR I的酶切位点,ACC合成酶基因两端含Kpn I和Sau3A I的酶切位点,这四种限制酶及其识别序列和切割位点如下图:
先用限制酶________ 分别对ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因进行切割后,再将它们拼接成融合基因,相应的Ti质粒和融合基因均使用限制酶________ 进行切割,以确保融合基因能够插入载体中。载体上卡那霉素抗性基因的作用是________ 。
(3)为了获得耐运储存、宜储存的番茄,应将融合基因________ (填“正向”或“反向”)插入启动子2A11的下游,原因是________ ,从而抑制乙烯的合成。在检测该融合基因是否整合到番茄植株的染色体DNA上时,________ (填“能”或“不能”)用放射性物质标记的ACC合成酶基因片段做探针进行检测,理由是________ 。
(1)图2中的2A11为特异性启动子,则该2A11应在番茄的
(2)合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶BamH I和EcoR I的酶切位点,ACC合成酶基因两端含Kpn I和Sau3A I的酶切位点,这四种限制酶及其识别序列和切割位点如下图:
限制性核酸内切酶 | 识别序列和切割位点 | 限制性核酸内切酶 | 识别序列和切割位点 |
BamH I | G↓GATCC | Kpn I | GGTAC↓C |
EcoR I | G↓AATTC | Sau3A I | ↓GATC |
先用限制酶
(3)为了获得耐运储存、宜储存的番茄,应将融合基因
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