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非选择题-解答题 适中0.65 引用1 组卷88
三七具有防治癌症、抗衰老、降血压血脂等功能,其主要活性成分皂苷尚不能人工合成。但因其生长周期长、病虫害严重、连作障碍等,市场上供不应求。请回答下列有关问题:
(1)现可通过组织培养技术,并大量培养特定细胞系,来实现皂苷的工业化生产。基本流程为:获取三七外植体——消毒——诱导愈伤组织——细胞培养——提取皂苷。
①获取的外植体首先要通过_______过程培养出愈伤组织。研究发现三七幼茎、幼嫩花蕾等作为外植体诱导形成愈伤组织的成功率较高,这可能因为_______
②将愈伤组织接种到发酵罐中进行细胞培养提取皂苷的过程_______(填“体现”或“未体现”)细胞全能性。在长期细胞培养中,愈伤组织细胞的器官形成能力会发生不可逆的下降,原因有染色体畸变、细胞核变异或_______等,因此需要定期培育新的愈伤组织来维持生产的可持续性。
(2)病毒诱导基因沉默(VIGS)是指通过将含有目的基因的重组病毒载体导入到宿主植物中,从而导致与目的基因高度同源的植物内源基因沉默的现象。现有三七中一个序列已知、功能未知的基因M,拟利用VIGS技术研究其功能。
①可通过_______方法扩增目的基因M,然后将其构建至VIGS载体,侵染三七植株。检测被侵染植株基因M的表达量,选择表达量_______的植株,观察其与对照组的表型差异。若沉默植株出现果实成熟延迟的现象,推测基因M可能与植物激素_______的合成有关。
②若要进一步验证基因M的功能,可将其构建至其他表达载体中并在新的植株中过量表达。若其确有前述功能,则新的转基因植株可能出现_______的表型。
18-19高二下·浙江衢州·期末
知识点:植物组织的培养及基本过程目的基因的获取目的基因的检测与鉴定 答案解析 【答案】很抱歉,登录后才可免费查看答案和解析!
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Rh2是人参细胞中一种重要的皂苷类物质,具有抗肿瘤和提高免疫力等功能。可利用植物细胞培养和转基因工程菌培养等不同方法生产Rh2。回答下列问题:
(1)利用植物细胞培养技术生产Rh2时,选用人参的幼根作为外植体,先对其进行____处理,再培养诱导出愈伤组织,然后在____培养基中振荡培养,使其分散成单细胞。将得到的单细胞进行多次____培养后获得大量的细胞培养物,采用____的方法破碎细胞后经分离纯化可获得大量的Rh2。将愈伤组织制成单细胞后再培养的优点是____
(2)为了克服植物细胞培养过程复杂、产物难分离等缺点,科研人员以酵母菌L菌株为受体,导入P基因和N基因,以期获得Rh2高产的R菌株。
①P基因和N基因的扩增:为了便于P基因和N基因定向连接,需在引物的____端(填“5”或“3”)加上限制性内切核酸酶识别序列。进行PCR扩增时通常在反应缓冲液中添加Mg2,目的是____
②重组表达载体构建和转化:将含有P基因和N基因的重组DNA与____分别进行双酶切处理,再用DNA连接酶处理,得到重组表达载体,然后导入到L菌株,可通过____判断重组DNA片段是否整合到L菌染色体上,筛选获得转化的酵母菌R菌株。
③生产力的检测与改进:将R菌株与L菌株置于相同条件下培养,发酵一段时间后分别检测Rh2和前体物质A的含量,结果如下图。

注:甲为前体物质A和Rh2混合物检测结果,作为标准参考。
据图可知,导入P基因和N基因起到了____的作用。为进一步提升R菌株Rh2的生产能力,可通过转基因技术、____等技术提高其____的能力来达成。
新冠病毒感染人体的关键在于新冠病毒的棘突蛋白(S蛋白)与人体的ACE2蛋白结合,从而进入人体细胞。我国科研人员最新的一项研究发现,可以用植物来表达S蛋白,这大大降低了新冠疫苗的生产成本。本氏烟草对病毒具有易感性,现欲利用基因工程、农杆菌转化等技术获得产新冠病毒S蛋白的转基因本氏烟草,请回答下列问题:
(1)获取S蛋白基因是培育新冠病毒S蛋白转基因本氏烟草的首要步骤。科研人员从新冠患者肺部组织细胞中分离并提取到编码S蛋白的RNA,若要通过PCR获取和扩增S蛋白基因,则首先需通过______获得S蛋白的cDNA.PCR技术通过控制______使DNA复制在体外重复多次循环,每次循环可分为______三步。
(2)已知编码S蛋白的RNA两端的部分序列为3'—CUUAAGCCGGUU……CCUAGGCUUAAG—5'。如图表为Ti质粒的部分结构示意图及四种限制酶识别序列和切割位点(“↓”处为切割位点)。现有方案①:利用限制酶EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割图示质粒和S蛋白基因以构建基因表达载体;方案②:利用限制酶EcoRⅠ和BamHⅠ切割图示质粒和S蛋白基因以构建基因表达载体,你认为应选择方案_____,不选择另一种方案的原因是_______
限制酶EcoR ⅠSma
识别序列和切割位点
限制酶BamH ⅠSau3A Ⅰ
识别序列和切割位点
(3)用含S蛋白基因的农杆菌侵染本氏烟草获得转基因植株后,还需利用________技术对该转基因植株是否能产生S蛋白进行检测鉴定。目前,我国生产新冠病毒S蛋白的方法是将目的基因导入仓鼠卵巢细胞,通过动物细胞培养获得,与通过动物细胞培养获得S蛋白相比,通过转基因本氏烟草获得S蛋白的成本大大降低,原因是______(答出两点)。

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