回答与枯草杆菌纯化和a-淀粉酶固定化过程有关的问题：
（1）培养基的准备：在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中，完成加水、装锅、加热排气、 保温保压适当时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，压力表的读数______________， 打开排气阀，旋开固定螺栓，开盖，才可以取出灭菌的培养基等物品。待培养基冷却至______________左右时倒平板。
（2）枯草杆菌是生产a-淀粉酶的优良菌种，为确定合适的稀释倍数，小组成员取1mL菌原 液进行如图1所示的操作，在无菌条件下，用______________取0． 1 mL稀释后的菌悬液进行 图2中____________所示的操作，接种后的平板在培养时的放置应如图3______________（选填“a”或“b”）所示。在统计菌落时，发现平板上的平均菌落数为33个，则每毫升菌原液中的细菌数大约为______________个。

（3）a-淀粉酶宜采用吸附法进行固定化，下列关于反应柱的理解，正确的是______________
A．反应物和酶均可自由通过反应柱B．反应物和酶均不能通过反应柱
C．反应物能通过反应柱，酶不能通过反应柱D．反应物不能通过，酶能通过
（4）为了确定筛选出的a-淀粉酶的应用价值，还需要进一步检测固相a-淀粉酶的活性，在该实验中，亲和层析洗脱液中加入KI-I₂指示剂后，试管中呈现______________色。相对于唾液淀粉酶，枯草杆菌产生的a-淀粉酶具有______________特性，从而有利于工业生产。